目的探讨Src激酶抑制剂PP2在大鼠脑缺血再灌注后对神经元延迟性死亡保护作用的机制。方法建立Wistar大鼠全脑缺血再灌注动物模型,分为无缺血再灌注正常空白对照组(sham),Src激酶抑制剂PP2实验组(PP2)和Src激酶抑制剂PP2类似物的实验对照组(PP3)。实验组及实验对照组Wistar大鼠在双侧颈动脉夹闭造成全脑缺血前30分钟于脑室内分别注射PP2和PP3,控制大鼠脑组织缺血时间均为10min,再灌注时间均为72h。于再灌注时取出大鼠脑组织,部分脑组织通过甲醛固定后行HE染色观察每组大鼠海马CA1区神经元存活数量;另外部分脑组织在-20℃环境下将丘脑背外侧皮层脑组织分离,并应用差速离心法分离出神经元,通过Western Blot分析神经元组分中Src激酶、NMDA受体及PSD蛋白的磷酸化变化情况。结果通过HE病理切片发现,在成功建立了大鼠全脑缺血再灌注动物模型中海马CA1区神经元出现延迟性死亡的现象,大鼠海马CA1区神经元死亡数量PP2实验组的明显少于PP3实验对照组。Western Blot分析结果显示:与空白对照组比较,实验组及实验对照组神经元出现缺血延迟性死亡时NMDAR2B、NMDAR2A、PSD93及Src激酶的磷酸化表达明显升高(P<0.001);实验组与实验对照组比较,Src激酶抑制剂PP2可显著下调脑缺血再灌注后NMDAR2B、NMDAR2A、PSD93及Src激酶的磷酸化表达(P<0.01)。结论脑缺血再灌注后Src激酶抑制剂PP2可以对神经元起到保护作用,其机制可能与NMDAR2B、NMDAR2A、PSD93及Src磷酸化表达水平的改变有关。
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