目的探讨钙磷蛋白(CAPS)在膀胱癌中的表达特征及其对肿瘤细胞生物学行为的影响。方法2023年7月至2024年1月,构建CAPS过表达与敲低的UM-UC-3膀胱癌细胞株。实验分组如下:过表达对照组(OvNC):转染空载慢病毒;过表达组(OvCAPS):转染CAPS过表达载体(pcDNA3.1-CAPS);敲低组(shCAPS.1、shCAPS.2):分别转染两种不同的CAPS短发夹RNA(shRNA)构建的慢病毒载体;敲低对照组(shNC):转染非特异性序列shRNA的慢病毒载体。通过荧光显微镜观察转染效率,采用RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测CAPS在各组细胞中的mRNA与蛋白表达水平。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验和Transwell小室实验系统评估其对膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。组间比较采用
t检验。
结果在UM-UC-3细胞中,CAPS的蛋白水平在不同实验组间存在显著差异。Western blot结果显示,OvCAPS组的CAPS蛋白表达量(0.61±0.03)高于OvNC组(0.38±0.02,
t=10.89,
P<0.05);而shCAPS.1组(0.21±0.01)和shCAPS.2组(0.20±0.01)的表达水平均低于shNC组(0.60±0.04,
t=14.72、14.45,
P<0.05)。功能实验进一步证实,CAPS能够显著影响膀胱癌细胞的生物学行为。CCK-8实验结果显示,CAPS过表达组在48 h时的细胞增殖能力高于对照组(0.63±0.08比0.44±0.06,
t=4.02,
P<0.05);敲低组的增殖能力则低于对照组(shCAPS.1:0.49±0.03比0.67±0.08,
t=4.28,
P<0.05;shCAPS.2:0.43±0.04比0.67±0.08,
t=5.99,
P<0.05)。Transwell迁移实验结果表明,CAPS过表达组细胞迁移能力高于对照组(747.3±14.2比284.7±14.0,
t=40.14,
P<0.05),而敲低组的迁移能力低于对照组(shCAPS.1:116.3±3.2比327.3±7.6,
t=44.43,
P<0.05;shCAPS.2:137.0±3.0比327.3±7.6,
t=40.48,
P<0.05)。侵袭实验亦显示相同趋势,CAPS过表达组侵袭能力高于对照组(881.3±12.1比370.3±16.5,
t=43.31,
P<0.05),而敲低组低于对照组(shCAPS.1:96.0±1.0比367.0±10.0,
t=37.45,
P<0.05;shCAPS.2:121.0±5.3比367.0±10.0,
t=29.46,
P<0.05)。
结论CAPS在膀胱癌细胞中呈高表达,通过促进细胞增殖、迁移与侵袭,可能在膀胱癌恶性进展中发挥重要作用。